南宫28 的TurboTEV蛋白酶是烟草蚀刻病毒（TEV）N1a蛋白催化片段的增强形式，作为一种半胱氨酸蛋白酶，它能够识别并切割位于Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly之间的特定位点，特别是在Gln和Gly之间进行切割。这款蛋白酶以其卓越的特异性和稳定性而闻名，且在4°C下依然能够保持强大的活性，适用于多种缓冲液，无需特殊条件，能够在最适合特定目标蛋白的缓冲液中使用。

TurboTEV蛋白酶的分子量为52kDa，并且带有GST和His标签，这使得它能够通过Ni螯合或谷胱甘肽（GSH）树脂轻松去除剪切标签。该蛋白酶的来源为大肠杆菌，其活性达到超过10单位/µg。在30°C的条件下，1单位TurboTEV蛋白酶能够在1小时内裂解3µg对照底物的85%。

南宫28 的TurboTEV蛋白酶应用于多种产品，包括:

• 蛋白质的裂解功能；
• 从重组蛋白中去除融合标签；
• 蛋白质和肽的纯化。

操作步骤

1. 在溶液中裂解：
A、准备新鲜的冰冷透析缓冲液，例如：25mM Tris-HCl,pH 8.0，150-500mM NaCl，14mM β-巯基乙醇。
B、稀释目标蛋白样品：
    (a) 使用透析缓冲液将目标蛋白稀释至1-2 mg/mL。若目标蛋白在透析缓冲液中聚集，则可略过此步骤。
    (b) 保留一小份未切割样品备用。
C、按照1:100（w/w）的比例加入TurboTEV蛋白酶，即100 mg目标蛋白对应10000单位(1mg)TurboTEV蛋白酶。
D、在4°C下用透析缓冲液透析过夜（约16小时）。

2. 去除TurboTEV蛋白酶：
A、通过上柱处理；
B、进行SDS-PAGE分析（可选）。

常见问题解答

1. 问：在TEV消化反应中缓冲液条件有何重要性？是否存在可能影响TurboTEV剪切效率的成分？
答：
    (a) 1mM DTT可用；
    (b) 不推荐使用10%的甘油；
    (c) 不推荐20mM组氨酸；
    (d) 不建议使用500mM NaCl；
    (e) 不建议使用100mM Tris；
    (f) β-巯基乙醇的效果类似于DTT，可加入。

2. 问：在剪切前是否需要进行缓冲液交换？
答：这是可能必要的。

南宫28自2003年成立以来，一直致力于为生物研究领域提供卓越的支持，包括免疫学、细胞生物学和分子生物学等多个领域。我们的产品种类丰富，涵盖代谢检测试剂盒、ELISA试剂盒、生化试剂、抗生素、核酸酶、蛋白酶等，旨在满足各类科研需求。